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液相色譜的滯後體積對測量結果有哪些影響?

發布時間:2019-11-25 點擊次數:876
 
  液相色譜儀(HPLC)中的滯後體積是指從流動相混合器到圓柱體的體積,包括混合器和圓柱體之間的溶劑混合器和連接管的體積。對於低壓混合係統,也包括泵容積。延遲量大可能導致重複性差,移植困難在常用的液相色譜係統中,滯後體積一般在0.2mL~5ml之間,這主要取決於裝置的設計。
  滯後量重要的部分是自動進樣器定量回路的容積。隻有當定量環的體積小於100μL時,才能近似忽略環對滯後體積的影響。當定量環的體積較大時,效果就會顯現出來。例如,當使用50μL定量環時,滯後體積為300μL。用1ml定量環,滯後體積為1250μL,直接影響色譜分離效果。在實際分離過程中,當色譜柱較薄時,必須考慮滯後體積的影響。解決辦法是更換較小的定量環,減少滯後體積。
  如果樣品瓶過滿,當瓶蓋緊且注射量大時,注射重複性會變差究其原因,是當樣品瓶中的樣品被抽出時,緊閉的瓶蓋無法使空氣及時進入,造成部分真空由於這種真空,注射器無法吸收足夠的樣品體積在情況下,對於揮發性稀溶液樣品,針頭中甚至可能出現氣泡,影響分析的正常操作。
  一些自動采樣器使用空針來克服這個問題,但是這種方法並不常用。更簡單的解決辦法是不要把樣品瓶灌得太滿。一般樣品大小在樣品瓶中的1至3倍之間。

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