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液相色譜儀進行分析方法檢測發展過程中對液相色譜儀係統設計溫度的設定及控製技術要求都相當高對於色譜柱及檢測器都要求能準確地控製管理工作生活環境以及溫度一般企業而言色譜柱的恒溫精度可以要求在±0.1~0.5℃之間檢測器的恒溫要求則更高。
在色譜儀分析係統中溫度對溶劑的溶解能力、色譜柱的性能、流動相的粘度都有影響一般來說,溫度升高,可提高溶質在流動相中的溶解度,從而降低其分配係數,但對分離選擇性影響不大;還可使流動相的粘度降低,從而改善傳質過程並降低柱壓除此之外,溫度太高易使流動相產生氣泡,對檢測結果造成幹擾。
液相色譜柱的溫度主要是由柱溫箱來控製,不同工作溫度對保留時間、相對保留時間都有影響柱溫升高可加快分離過程,但因樣品保留時間不穩將增加檢測工作的麻煩,分辨率也可能下降;相反當柱溫低,分辨率提高,但分離過程時間會加長,因為在溫度低的情況下,流動相黏度增加會延長檢測時間增加泵的磨損,同時溶解度相對下降會出現緩衝鹽結晶而堵塞泵、進樣閥、管道、色譜柱的現象,雜質吸附在填料上而難於洗脫,從而影響色譜柱的使用壽命不同的檢測器對溫度的敏感度不一樣紫外檢測器一般在溫度波動超過±0.5℃時,就會造成基線漂移起伏示差折光檢測器的靈敏度和小檢出量常取決於溫度控製精度,因此需控製在±0.001℃左右微吸附熱檢測器也要求在±0.001℃以內。
總的說來液相色譜儀分析檢測中,柱溫對分離的影響並不顯著,通常實驗在室溫下進行操作在液固色譜中有時將極性物質(如緩衝劑)加入流動相中以調節其分配係數,這時溫度對保留值的影響很大。